細(xì)胞名稱：兔腎細(xì)胞系ATCC

細(xì)胞代次：P4

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細(xì)胞凍存：無血清凍存液

細(xì)胞傳代：第一次建議1:2

培養(yǎng)步驟

a、細(xì)胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵

箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng),

1)對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞

消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,使之脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液

,補加1-2mL培養(yǎng)基重懸。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的細(xì)

胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例

分到新的含8ml培養(yǎng)基的新瓶中。

方法二:可選擇半換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新瓶

中。

b、細(xì)胞凍存:

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml培養(yǎng)液終止消化,再輕

輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;

3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。

4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上

再轉(zhuǎn)入液氮罐中。C、細(xì)胞復(fù)蘇:

1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后

用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3、棄上清,沉淀用5ml培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 天,換用新鮮培養(yǎng)

基繼續(xù)培養(yǎng)。

C、細(xì)胞復(fù)蘇:

1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后

用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3、棄上清,沉淀用5ml培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 天,換用新鮮培養(yǎng)

基繼續(xù)培養(yǎng)。

注意事項：有些細(xì)胞比較特殊，如貼壁不牢，在運輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落，這是正常現(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入消化液1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

收到貨后處理：

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的 辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶,消毒后

放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處

理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照保存( 40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售

后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,以便進

行對比培養(yǎng),換液擰松瓶蓋),該細(xì)胞的STR鑒定可向客服咨詢索取。

YS2631C小鼠紅白血病細(xì)胞

YS2632C小鼠垂體瘤細(xì)胞

YS2633C小鼠皮膚成纖維細(xì)胞

YS2634C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

YS2635C小鼠惡性肉瘤細(xì)胞

YS2636C小鼠白血病細(xì)胞

YS2637C小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞

YS2638C家貓肺成纖維細(xì)胞

YS2639C家貓皮膚成纖維細(xì)胞

YS2640C狗肺成纖維細(xì)胞

YS2641C袋鼠腎細(xì)胞

YS2642C非洲綠猴腎細(xì)胞系

YS2643C羅猴胎腎上皮細(xì)胞系

YS2644C羅猴胎腎細(xì)胞系

YS2645CVero細(xì)胞衍生株

YS2646C豬胎睪丸傳代細(xì)胞系

YS2647C豬腎傳代細(xì)胞系

YS2648C豬腎細(xì)胞系

YS2649C昆蟲細(xì)胞系

YS2650C昆蟲卵巢細(xì)胞系

YS2651C昆蟲細(xì)胞

YS2652C草魚腎細(xì)胞系

YS2653C草魚肝臟細(xì)胞

YS2654C草魚腎臟細(xì)胞

YS2655C團頭魴尾鰭細(xì)胞

YS2656C白鰱尾鰭細(xì)胞

YS2657C斑馬魚胚胎細(xì)胞

YS2658C鮭魚胚胎細(xì)胞

YS2659C大黃魚腎細(xì)胞

YS2660C鯉魚上皮細(xì)胞

YS2661C兔腎細(xì)胞系

YS2662C鱗癌細(xì)胞(兔模型)

YS2663C家兔腎上皮細(xì)胞

YS2664C家兔皮膚成纖維細(xì)胞

YS2665C家兔主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

YS2666C果蠅細(xì)胞

YS2667C果蠅胚胎細(xì)胞

YS2668C貓腦星形膠質(zhì)細(xì)胞

YS2669C鴨胚細(xì)胞

YS2670C菜青蟲卵巢細(xì)胞

YS2671C晚秋粒蟲/草地貪夜蛾卵巢細(xì)胞

YS2672C蝙蝠肺細(xì)胞

YS2673C犬腎細(xì)胞系

YS2674C猴孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞

YS2675C豚鼠心肌細(xì)胞

YS2676C豚鼠肺成纖維細(xì)胞

YS2677C豚鼠皮膚成纖維細(xì)胞

YS2678C斑馬魚細(xì)胞

YS2679C迪慶綿羊皮膚成纖維細(xì)胞

YS2680C綿羊肺成纖維細(xì)胞

YS2681CCCC-ESF-1人胚皮膚成纖維細(xì)胞

更多細(xì)胞歡迎咨詢我們：兔腎細(xì)胞系ATCC